Transgénico en la Salmonelosis (ventajas y desventajas)

 Vacunas Atenuadas de Salmonella contra Salonelosis

• La cepa de S. enterica SL3261 es una mutante en el gen aroA. La vacuna SL3261 se ha usado como vector de diversos genes heterólogos.
• Las cepas de Salmonella atenuada se obtienen de genes mutantes involucrados en el metabolismo bacteriano y en la replicación del ADN, que afectan su capacidad de multiplicarse dentro del hospedero (cepa avirulenta); pero no su capacidad invasora ni su habilidad de inducir una respuesta inmune. Su poca capacidad de multiplicarse, le permite una rápida eliminación de la circulación sin inducir la enfermedad.
• Los genes mutados para la atenuación son los aromáticos (aro), codifican enzimas biosintéticas, su falta dismnuye el crecimiento bacteriano postinfección.

Las mutantes atenuadas de Salmonella invaden las células M de la mucosa intestinal y migran a las células linfoides del sistema reticuloendotelial donde no causan enfermedad, pero activan las respuestas inmunes humoral y celular; tanto contra salmonella como contra antígenos heterólogos recombinantes que la bacteria pueda expresar y transportar.

Ventajas y Desventajas de los organisos genéticamente modificados o transgénicos

Bibliografía

• Fernández, María del Rocío. Alimentos transgénicos: ¿Qué tan seguro es su consumo? Revista Digital Universitaria [Internet]. 2009; 10 (4). [acceso 25 de junio de 2016]. Disponible en: http://www.revista.unam.mx/vol.10/num4/art24/art24.pdf
• Reyes S. María Soledad, Rozowski N Jaime. Alimentos Transgénicos. Revista chilena de nutrición [Internet]. 2003; 30 (1): 21-26. [acceso 25 Junio de 2016]. Disponible en: http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0717-75182003000100003 
• Gómez Oscar. Vacuna atenuada de Salmonella como vector de antígenos heterólogos. Biomédica. [Internet]. 2000; 20(2): 131-143. [acceso 2016 Junio 25]. Disponible en: http://www.revistabiomedica.org/index.php/biomedica/article/view/1056

ADN Recombinante artificial para Salmonelosis

ADN RECOMBINANTE ARTIFICAL

Es aquel ADNr que se obtiene con el uso de ingeniería genética para innovaciones biotecnológicas como el desarrollo de vacunas.

Por ejemplo, se utilizan técnicas recombinantes de atenuación de cepas de Salmonella para producir vacunas contra la salmonelosis:

• Se manipula el material genético de Salmonella para introducir mutaciones para convertirla en avirulante pero sin afectar su capacidad invasora. La mutaciones se dan por inserciones de transposones (Tn) o deleciones (d) que inactivan o remueven porciones de genes que codifican para factores de virulencia. Como las mutaciones daroA, dasd o cya::Tn10 que disminuyen la virulencia de Salmonella o Shigella, manteniendo la capacidad de producir una respuesta inmune en el organismo.

Las vacunas contra Salmonella capaces de prevenir la fiebre tifoidea se han constituido en una prioridad de salud pública para las regiones más pobres del mundo donde la enfermedad es endémica y constituyen la única alternativa eficaz para proteger a la población contra esta enfermedad.

Bibliografía

• García Fernando. Métodos moleculares para el desarrollo de vacunas. Acta pediátr. costarric [Internet]. 1999; 13( 2 ): 55-59. [acceso 2016 Junio 19] Disponible en: http://www.scielo.sa.cr/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1409-00901999000200002
• Gómez Oscar. Vacuna atenuada de Salmonella como vector de antígenos heterólogos. Biomédica. [Internet]. 2000; 20(2): 131-143. [acceso 2016 Junio 19]. Disponible en: http://www.revistabiomedica.org/index.php/biomedica/article/view/1056/1171

ADN recombinante en la naturaleza para Salmonelosis

ADN RECOMBINANTE NATURAL
Es aquel ADNr que se genera de forma biológica dentro de los organismos.
Se obtiene mediante un proceso denominano "transducción generalizada" o transferencia genética desde una célula donadora a otra receptora mediado por bacteriófagos que contienen ADN genómico de la primera.

• Para Salmonella existe un fago denominado P22 de tipo moderado que es el responsable de la trasferencia genética o de los ADNrecombinantes. 

El fago P22 es un bacterófago lisogénico que cuando entra en fase lítica, replica su ADN que puede recombinarse con el de Salmonella; de modo que al lisarse la bacteria, el fago puede llevar genoma de Salmonella e infectar a otra con su ADNrecombinado.

Bibliografía:

• Iáñez Enrique. Curso de microbiología general de Enrique Iáñez. [Pagina Principal de Internet] UNNE. 1998. [acceso 2016 Junio 19]. Disponible en: http://www.biologia.edu.ar/microgeneral/micro-ianez/26_micro.htm
• Genetic Backgroud. PHAGE P22. [Internet] College of Science SDSU. 2004. [acceso 2016 Junio 19]. Disponible en: http://www.sci.sdsu.edu/~smaloy/Research/pdf%20files/P22.pdf

Prueba Molecular para Salmonelosis

• Debido al incremento de la prevalencia de la Salmonella spp y su complejo ciclo de vida, la existencia de métodos de detección rápidos y efectivos son importantes como base de las estrategias de control. 
• Entre las técnicas moleculares aplicables a la detección de Salmonella spp. en alimentos, encontramos: PCR, PCR-TR, pirosecuenciación, NASBA, Hibridación de ADN con sondas y microensayos, entre otras.
  
   
   

 

 Bibliografía:

• Achí R, Barrantes K, García C, Chacón L. Estandarización de una PCR para la detección del gen invA de Salmonella spp. en lechuga. Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiología. 2010: 30 (1) (acceso 10 de junio de 2016). Disponible en: http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=199416355005
• Igna E.  Diagnóstico molecular y sus ventajas frente al método tradicional para l detección de Salmonella spp. en carcasas porcinas. Universidad Nacional Mayor de San Marcos: Sirivus. (acceso 11 de junio de 2016) Disponible en: http://veterinaria.unmsm.edu.pe/files/diagnostico_molecular_inga.pdf
• Pedraza J, Pereira N, Soto Z, Hernández E, Villareal J. Aislamiento microbiológico de Salmonella spp. y herramientas moleculares para su detección. Salud Uninorte. Barranquilla (Col.) 2014; 30 (1): 73-94. (acceso 10 de junio de 2016) Disponible en: http://rcientificas.uninorte.edu.co/index.php/salud/article/viewFile/5458/4766
• Luigi T, Rojas L, Valbuena O. Reacción en cadena de la polimerasa para la identificación de Salmonella spp. usando el gen invA. Revista de la Facultad de Ciencias de la Salud. Universidad de Carabobo. 2015; 19 (3): 41-46. (acceso 11 de junio de 2016) Disponible en: http://salus-online.fcs.uc.edu.ve/salus2015/19-3/SALMONELLA.pdf

Pruebas de tamizaje y confirmatoria en Salmonelosis

Para identificar Samonella spp se puede realizar pruebas de tamizaje mediante:

• Discos de AMP, AMC, CEP, FOX y C3G (CTX, CAZ) o C2G (CXM).

Y pruebas confirmatorias como son:

• Caracterización de la enzima (PCR, hibridación con sondas específicas de familia, punto isoeléctrico, secuenciación de ADN.

Para la identificación del género de Salmonella se puede realizar:

• Agar triple azúcar hierro (TSI)
• Agar lisina hierro (LIA) 

Bibliografía:

• PAHO-USAID. Detección de mecanismos de resistencia a los antimicrobianos en el laboratorio. (sede Web). Estados Unidos. (acceso 04 de junio de 2016). Disponible en http://www.paho.org/PAHO-USAID/dmdocuments/AMR_Deteccion_Mecanismos_Resistencia_Antimicrobianos_Laboratorio.pdf
• López M. Evaluación de la resistencia antibiótica de los microorganismos aislados en casos de mastitis clínica en una exploración lechera. Universidad de San Carlos de Guatemala. Guatemala: 2008. (acceso 05 de junio de 2016) Disponible en:   http://biblioteca.usac.edu.gt/tesis/10/10_1098.pdf